小麦TaGAPC1基因及其启动子的克隆与功能分析
秦凌月2; 邓西平1; 杨淑慎2
刊名农业生物技术学报
2018
卷号26期号:10页码:1639-1649
关键词甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) 非生物胁迫 启动子 顺式作用元件
英文摘要

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)是糖酵解过程中的关
键酶。作为GAPDH的亚型,GAPC(cytosolic glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)催化3-磷酸甘油
醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,但是关于GAPC在非生物胁迫应答中作用的研究却并不充分。本研究从
中国春小麦( Triticum aestivum )中克隆出了 TaGAPC1 基因(GenBank No. KU246046),其编码337个氨基酸,
并克隆出基因上游973 bp的序列,将其命名为P973。通过融合绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,
GFP)报告基因,使用基因枪法瞬时转化洋葱( Allium cepa )表皮细胞进行亚细胞定位,结果显示TaGAPC1
蛋白定位于细胞膜上。使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术,分析 TaGAPC1
基因在根、茎、叶中,以及干旱(PEG8000)、盐(NaCl)、脱落酸(abscisic acid,ABA)和低温(4 ℃ )非生物胁迫下
的表达模式。结果表明 TaGAPC1 基因在叶、根、茎中的表达量依次下降,在PEG8000、NaCl和ABA胁迫
下的表达量显著上升,但对 4 ℃ 的响应不明显。根据 PLACE (http://www.dna.affrc.go.jp/PLACE/)和
PlantCARE (http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)数据库分析,P973启动子序列中包
含响应干旱、ABA、低温和创伤等胁迫的顺式作用元件,如干旱应答元件(drought-responsive element,
DRE)、激素应答元件包括ABA应答元件(ABA-responsive element, ABRE)、MYB结合位点(MYB-binding
site, MBS)和WUN-motif等。根据顺式作用元件的分布,扩增得到5个启动子5'端缺失片段,分别命名为
P844、P738、P605、P475和P256。构建6条启动子序列融合β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase, GUS )的
表达载体,并瞬时转化烟草( Nicotiana batacum )植株,测定PEG8000、NaCl、ABA和4 ℃ 胁迫下各启动子驱
动的GUS酶活。结果表明, - 973~ - 605启动子区域在 TaGAPC1 基因应答PEG8000和NaCl胁迫中具有关
键作用, - 973~ - 475启动子区域对应答ABA胁迫至关重要。本研究从分子水平初步阐释了 TaGAPC1与
非 生物胁迫应答的关系,为深入探讨其抗逆的分子机制奠定了基础。

语种中文
内容类型期刊论文
源URL[http://ir.iswc.ac.cn/handle/361005/10367]  
专题水土保持研究所_水保所知识产出(1956-2013)
作者单位1.中国科学院 水土保持研究所/黄土高原土壤侵蚀和旱地农业重点实验室
2.西北农林科技大学 生命科学学院
推荐引用方式
GB/T 7714
秦凌月,邓西平,杨淑慎. 小麦TaGAPC1基因及其启动子的克隆与功能分析[J]. 农业生物技术学报,2018,26(10):1639-1649.
APA 秦凌月,邓西平,&杨淑慎.(2018).小麦TaGAPC1基因及其启动子的克隆与功能分析.农业生物技术学报,26(10),1639-1649.
MLA 秦凌月,et al."小麦TaGAPC1基因及其启动子的克隆与功能分析".农业生物技术学报 26.10(2018):1639-1649.
个性服务
查看访问统计
相关权益政策
暂无数据
收藏/分享
所有评论 (0)
暂无评论
 

除非特别说明,本系统中所有内容都受版权保护,并保留所有权利。


©版权所有 ©2017 CSpace - Powered by CSpace